Dieses Kit verwendet isothermische Nukleinsäure -Schnellverstärkungstechnologie. Bei einer konstanten Temperatur (typischerweise 39–42 Grad) erleichtern Hilfsproteine und Einzelstrangbindungsproteine die Bildung eines Komplexes zwischen Rekombinase und Primern. Der Komplex sucht dann nach und bindet an die Zielhomologiedomäne. Diese Bindung bildet am homologen Ort eine D-Loop-Region, die den Strangaustausch initiiert. Da die Rekombinase dissoziiert, bindet die Polymerase an das 3' -Ende des Primers und die Startkettenverlängerung. Durch die Verwendung der NFO -Enzymaktivität wird basierend auf der Vorlage eine spezifische Molekularsonde eingeführt, und die kolloidale Goldtechnologie (Sandwich -Methode) wird verwendet, um das Endergebnis zu erkennen.
【Merkmale】
Hohe Spezifität
Bietet außergewöhnliche Empfindlichkeit und Spezifität für den Nukleinsäurerweis.
Schnell
Die Reaktionszeit beträgt nur 15 Minuten und liefert schnelle Ergebnisse.
Komfortabel
Die Reaktionskomponenten befinden sich in trockener Pulverform, wodurch sie einfach zu bedienen sind und aufbewahren.
Einfach
Wird mit Metallbädern, Wasserbädern oder anderen Grundausrüstung verwendet, wodurch teure PCR -Verstärker erforderlich sind.
【Primerdesign】
Es wird empfohlen, Primer mit einer Länge von 30–35 NT zu verwenden. Kürzere Primer können die Verstärkungsgeschwindigkeit und die Erkennungsempfindlichkeit reduzieren. Der nachgelagerte Primer sollte eine Modifikationsgruppe (üblicherweise Biotin) am 5' -Ende haben. Das Design sollte sekundäre Strukturen vermeiden, die die Verstärkung behindern können. Die empfohlene Amplikonlänge beträgt 150–500 NT.
【Kolloidales Goldsondendesign】
Die zum Zielfragment komplementäre Sondensequenz sollte 46–52 nt lang sein und zwischen den stromaufwärts gelegenen und stromabwärts gelegenen Primern ausgelegt.
- Ein Antigenmarker (typischerweise FAM) ist am 5' -Ende gebunden.
- A Dspacer(Tetrahydrofuran, thf) ist in der Mitte der Sonde zwischen 5 'und 3' Enden als Erkennungsstelle für NFO markiert.
- Eine Modifikationsgruppe wie Amin, Phosphat oder C 3- Spacer ist am 3 'Ende gekennzeichnet.
【Kit -Komposition】
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CEntfernung |
COnent |
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ADPuffer |
1,6 ml × 1 Tube |
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B -Puffer |
150 μl × 1Tube |
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POssitive Steuerungsvorlage -- iV |
100 μl × 1Tube |
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POssitive Kontrollsonde und Primer mix-iV |
70 μl × 1Tube |
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Reagenss |
48T |
【Packspezifikationen】
- Spezifikationen: 48 T/Pack
【KIT Speicher】
- Speicherbedingungen: Speichern Sie in einer Umgebung mit konstanter Temperatur bei weniger als oder gleich -20 ºC. Halten Sie sich von leichtem und vermeiden Sie schweren Druck.
- Haltbarkeit: 14 Monate.
【Notiz】
- Für die Entwicklung von MIRA-Projekten müssen selbstverwalterte Primer/Sonden hinzugefügt werden.
- Das Kit ist in zwei Arten erhältlich - DNA und RNA. Der RNA -Typ enthält eine reverse Transkriptase, die eine Amplifikation mit RNA, dsDNA und SSDNA als Vorlagen ermöglicht. Der DNA -Typ kann nur mit dsDNA als Vorlage verstärken.
- Erhältlich in drei Typen - Basis, Fluoreszenz und Teststreifen. Wählen Sie das entsprechende Kit basierend auf Ihren Anforderungen und verwenden Sie die entsprechenden Primer/Sonden.
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