Dieses Kit verwendet isothermische Nukleinsäureverstärkungstechnologie, die bei Raumtemperatur und einem konstanten Temperaturbereich (typischerweise 39 Grad –42 Grad) betrieben wird. Der Prozess beginnt mit der umgekehrten Transkriptase -synthetisierenden komplementären DNA (cDNA) aus RNA -Templates unter Verwendung spezifischer Primer. Der durch Rekombinase und Primer gebildete Komplex, unterstützt durch Hilfsproteine und Einzelstrangbindungsproteine, sucht nach der Zielhomologie-Domäne und bindet an die Ziel-Homologie-Domäne. Dies führt zur Bildung einer D-Loop-Region am homologen Standort und initiierende Strangaustausch. Sobald die Rekombinase dissoziiert, bindet die Polymerase an das 3' -Ende des Primers und initiierende Kettenverlängerung. Das Kit verwendet auch die Exonuklease-Aktivität und spezifische molekulare Sonden für die Echtzeitüberwachung des Amplifikationsprozesses durch Fluoreszenzerkennungsgeräte.
【Merkmale】
Hohe Empfindlichkeit
Entwickelt für eine präzise RNA -Amplifikation, um eine genaue Erkennung zu gewährleisten.
Schnell
Die Reaktion wird in nur 20 Minuten abgeschlossen und bietet eine schnelle Verstärkung.
Stabil
Das trockene Pulverformat vereinfacht das Handling und die Lagerung.
Breite Kompatibilität
Kompatibel mit einem Bereich von quantitativen PCR -Instrumenten von Fluoreszenz, konstanter Temperaturfluoreszenzverstärker und anderen Fluoreszenz -Erkennungsgeräten.
【Primerdesign】
Für eine optimale Leistung sollten Primer 30 bis 35 bp lang sein. Kürzere Primer können die Verstärkungsgeschwindigkeit und -sensitivität beeinflussen. Die Primer sollen sekundäre Strukturen vermeiden, die den Verstärkungsverfahren behindern können. Die empfohlene Amplikonlänge liegt zwischen 150 und 500 bp.
【Fluoreszenzsondenkonstruktion】
Die Sondensequenz überlappt sich nicht mit der spezifischen Primer -Erkennungsstelle, die Länge ist 46-52 nt, und die Sequenz vermeidet die Palindromsequenz, die interne Sekundärstruktur und die kontinuierlichen wiederholten Basen. Es sind vier Modifikationsstellen in der Sonde: Ein dspacer (tetrahydrofur, thf), der in der Mitte des Mitte des Mitte des Mitte des Mitte des Mitte des Mitte des Mitte des Mitte des Mitte des Mitte des Mitte ist, ist in der Mitte des Mitte des Mitte. Erkennungsstelle für Exonuklease; Eine fluoreszierende Gruppe ist stromaufwärts der THF -Site markiert, eine löschende Gruppe wird stromabwärts gekennzeichnet, und der Abstand zwischen den beiden Gruppen ist 2-4 nt; THF ist ungefähr 15 nt vom 3 'Ende entfernt, und das 3' Ende ist mit einer Blockierungsgruppe wie einer Amingruppe, einer Phosphatgruppe oder einem C 3- -Abentacer gekennzeichnet.
【Kit -Komposition】
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CEntfernung |
COnent |
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Ein Puffer |
1,6 ml × 1 Tube |
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B -Puffer |
150 μl × 1Tube |
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Reagens |
48T |
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Handbuch Handbuch |
1 Kopie |
Notiz:In Anbetracht des Problems des Nukleinsäurerabbaus bieten RNA -Serienprodukte keine positiven Kontrollvorlagen und Primersonden.
【Packspezifikationen】
- Spezifikationen: 48 T/Pack
【KIT Speicher】
- Speicherbedingungen: Speichern Sie in einer Umgebung mit konstanter Temperatur bei weniger als oder gleich -20 ºC. Halten Sie sich von leichtem und vermeiden Sie schweren Druck.
- Haltbarkeit: 14 Monate.
【Notiz】
- Für die Entwicklung von MIRA-Projekten müssen selbstverwalterte Primer/Sonden hinzugefügt werden.
- Das Kit ist in zwei Arten erhältlich - DNA und RNA. Der RNA -Typ enthält eine reverse Transkriptase, die eine Amplifikation mit RNA, dsDNA und SSDNA als Vorlagen ermöglicht. Der DNA -Typ kann nur mit dsDNA als Vorlage verstärken.
- Erhältlich in drei Typen - Basis, Fluoreszenz und Teststreifen. Wählen Sie das entsprechende Kit basierend auf Ihren Anforderungen und verwenden Sie die entsprechenden Primer/Sonden.
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